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在火星中使用平行线分析(PLA)评估并行性

Mario Schneider(1),Michael Haitz(1),Klaus-JürgenZiegler(1),卡尔彼得斯(2) (1)B德赢vwin官网客服MG Labtech GmbH,Ortenberg,德国;(2)U德赢vwin官网客服SA,Cary NC BMG Labtech Inc. 02/2019
  • 将平行线分析应用于前列腺素D合酶(造血型)的抑制剂结合数据
  • 基于荧光偏振的抑制剂筛选测定估计相对结合型效力
  • Clariostar.®执行FP测量和PLA分析

介绍

对于具有较高效力的药物化合物筛选对许多药物发育部门具有敏锐感兴趣。发现导致与参考物质相同的化合物,但在低剂量下可以是降低副作用风险和降低制造成本的关键。然而,这些类型的生物测定在其他研究领域也很常见。德赢国际是真是假并行线分析(PLA)通常在这种情况下应用,以证明潜在剂量响应曲线的并行性,随后估计相对职能物质与参考物质相比。在这里,我们描述了如何在BMG Labtechs数据分析软件中应用PLA以德赢vwin官网客服抑制抑制剂的结合数据,以评估前列腺素D合酶抑制剂的结合效率。


平行线分析原理

并行线测定在药物EF FiCacy测试中是常见的,其中基于其相对效力将一个或多个测试物质与参考物质进行比较。只有在潜在的剂量 - 响应曲线平行时才应计算后者。平行线分析(PLA)是评估曲线是否平行的统计方式,如果是,则计算物质的相对型效力。

图。图1显示了测试(紫色)和参考物质(橙色)的两个典型剂量响应曲线;两者都认为具有相当的斜率和渐近斑点并联。
可以在这些参数的基础上使用不同的统计方法来完成PLA以评估曲线的并行性。

评估并行性的差异测试
使用差异测试方法,测试和参考曲线具有共享参数(约束,全球化)。同时,所有曲线都没有在不同的曲线(不约束)之间没有共享的参数。基于F-ORCHI²测试比较这些FITS的剩余平方和。计算p值,指示未经控制的(p值小于1)或优选的模型(p值接近1)。该概念也从方差分析(ANOVA)达到了相同的结果。


评估并行性的等价测试
虽然上述差异测试方法基于FI T质量指标进行比较参考和测试曲线,但等效测试方法将其自身进行比较。因此,MARIS Fi单独测试曲线和参考曲线,随后计算每个参考和测试曲线对的对应FI T参数(例如斜率和渐近)的比率。这些比率的确认间隔另外根据Fieller定理计算。如果计算的CON FI DENCENT间隔完全在预测的等效间隔内完全下降,则可以并行地认为给定参考和测试曲线。等效间隔是基于历史数据,参考资料或某些法律机构给出。

使用火星的抑制剂绑定数据的平行线分析
我们将PLA应用于前列腺素D合酶抑制剂(PGDS)筛选测定的数据(Cayman Chemicals#600007),其中两个化合物,新型抑制剂TFC 007和良好表征的参考抑制剂HQL-79以各种浓度施加以替换a预先结合和流体标记的PGDS抑制剂。随后是Clariostar检测到的流动偏振的变化读者。


仪器设置

视镜设置 荧光极化,终点
过滤器 482-16 / LP504 / 530-40
收益和焦点 在测量之前调整
目标MP. 200(在DMSO控制上)
通用设置 闪存号码 200.
建立时间 0.1秒

*有关仪器设置和测定背景信息的详细信息,请参阅BMG LabTech应用笔记285。德赢vwin官网客服

分析结合曲线以估计与HQL-79相比TFC 007的相对(结合)效力。为此,读者带来的火星分析软件被采用。并行线路分析窗口可通过“主页”选项卡中的“计算”按钮访问。请注意,MARS中的PLA需要存在的标准,微孔板布局中至少有两组,具有相应的浓度或稀释值。需要将一个组定义为参考组,另一组对应于测试化合物的数据。可以选择仅使用参考组比较选择的测试化合物基团或将参考组与所有其他化合物组进行比较。Mars提供不同的型号来进行相应的曲线。对曲线的并行性测试可以通过差异测试或通过等价测试来完成(参见图2)。在前一种情况下,一个人必须在后面的情况下选择在文件过程中将共享的参数,而在后一种情况下,这些参数将用于上一节中提到的比率计算。

成绩与讨论

与HQL-79相比,MAR中的PLA用于估计TFC 007的抑制效力。与HQL-79相比,PLA显示约2.46的TFC 007的日志(相对效力),其对应于约300的相对效力(参见图3)。这意味着TFC 007具有比HQL-79更高的抑制效率为300倍。请注意,通过将此电缆参数置于10的功率,可以将日志(相对效力)转换为火星的相对效力。

结论

平行线分析(PLA)是评估经常在生物测定中获得的剂量反应曲线的并行性的常见方法。将不同的统计方法实施到BMG Labtech的德赢vwin官网客服数据分析软件火星为了评估剂量 - 响应曲线并行性并估计相对型恒期性。这里,造血前列腺素D合酶抑制剂TFC 007的(相对)结合效力估计比在火星中使用PLA的HQL-79高约300倍。


参考资料

1. GOTTSCHALK,P. G.,&DUNN,J. R.(2005)。中国生物制药统计学报,p。437-463,DOI:10.1081 / BIP-200056532
2.美国药业统计公约。(2012年和2012C)。首先补充USP 35-NF 30,p。5160-5174和5186-5200。
3.欧洲委员会。(2011年),欧洲药典,p。551-579。

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