1536孔板中基于细胞和生物化学高通量筛选

主讲人:Gene Ananiev博士(威斯康辛大学,Carl Peters博士(BMG实验室技术),Iain Russell博士(迷宫)德赢vwin官网客服

在这次科学演讲中,威斯康辛大学麦迪逊分校小分子筛选设备的发言人Gene Ananiev博士讨论了在1536孔板上进行高通量筛选的两个例子,介绍了分析的小型化和优化方法。

这两个项目是为客户设立的,包括基于细胞的荧光素酶报告基因检测和基于vwin088alphascreen的蛋白质-蛋白质相互作用筛选。


在第一个项目中,使用CRISPR/Cas9将纳米荧光素酶(Nluc)基因敲入神经祖细胞内源性的人FMR1基因。这样做是为了创建一个健壮的FMR1-Nluc报告型hiPS细胞系。功能测定证实Nluc活性准确报告FMR1基因表达水平。此外,从该细胞系衍生的神经祖细胞被优化为高通量筛选。


在第二个项目中,重点是耐抗生素的细菌感染。随着世界范围内抗生素耐药性的上升,迫切需要找到能够克服耐药性机制的新型抗生素。在这项研究中,已经鉴定出9种有效的抑制剂。它们产生的响应曲线IC50值<40 μM。此外,两种化合物直接与PriA结合,证明了这种筛选策略的成功。使用小型化的AlphaScreen测试,成本大大降低,蛋白质-蛋白质相互作用的吞吐量增加。


除了Ananiev博士,BMG LABTECH的Carl Peters博士和Labcyte的Iai德赢vwin官网客服n Russell博士强调了项目中使用的微孔板读取器和配药溶液。

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