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BMG Labtech微孔板读卡器中Neisseria Meningitid德赢vwin官网客服is的生长(ACU)

凯里L. Cutter. 英格兰西部布里斯托尔 03/2007
  • 使用BMG Labtech微孔板读者的自动化细胞生长和培养研究,配备ACU德赢vwin官网客服
  • Neisseria Meningitidis.用于测试大气控制单元,因为它需要最佳5%CO2成长和茁壮成长
  • 与使用CO相比,使用ACU的稀培养物中观察到的增长率改善2控制孵化器

介绍

众所周知,所有生物都需要一定,但不一定是类似的二氧化碳水平,用于生长和繁殖。随着有机体不能分开,该水平正在增加的时期对应于滞后阶段,直到CO的临界集中2到达了。


脑膜炎球菌被认为是一种最挑剔的微生物,就生长需要而言,人们很早就认识到大多数菌株Neisseria Meningitidis.需要或受益,浓度的CO2大于大气。因此,这种有机体特别适用于对CO的研究2影响。


在这项研究中,一种菌株Neisseria Meningitidis.用于评估与大气控制单元(ACU)连接的BMG Labtech多模板读取器的效率德赢vwin官网客服,以提供5%的CO2。这是通过比较Neisseria Meningitidis.在BMG La德赢vwin官网客服btech读者中,有二氧化碳孵化器(设置为提供5%CO2)和在大气公司的孵化器2


材料与方法

  • 德赢vwin官网客服BMG LABTECH微孔板读者与ACU
  • Lucy 1,Anthos,读者没有大气控制

Neisseria Meningitidis.C751在脑心脏输注(BHI)琼脂上生长,补充有10%胎牛血清(FBS),在37℃和5%CO2过夜。第二天,将几种菌落重新悬浮在补充10%FBS的10ml Bhi肉汤中。将其连续稀释至10-6℃,将每种稀释液的200μl样品一式三份分配到无菌96孔微孔板中。每小时(ABS过滤器405nm)的吸光度读数在BMG Labtech板读数器中每小时(ABS过滤器405nm),用ACU(设定为37°C,5%CO德赢vwin官网客服2)在24小时内。


将相同的微孔板置于37°C,5%CO2培养箱和37℃无补充CO培养箱2,使用Anthos Lucy 1微孔板读卡器在0,1,2,3,4,6,8和24h中取出吸光度读数(405nm)。


一旦为所有治疗收集吸光度读数,空白介质控制(未显示的值)用于调整值以表示OD增加。然后使用每种治疗的最大OD计算细菌生长的百分比细菌生长为100%。数据在两个单独的场合上从三份井中取出,以提供六个数据集进行分析。Microsoft Excel用于绘制图形,Minitab 13用于进行统计显着性的测试。

成绩与讨论

从图1-3所示的数据中明显看出,对于所有三种治疗的起始塞和生长速率有明显的相关性。


在较高的起始接种量时,不同处理之间的细菌生长似乎差别不大。这很可能是由于有足够多的生物存在,以产生一个临界水平的CO2因此,在没有外部CO的情况下,能够启动增长2资源。


但是,增长率的差异n.Meningitidis.C751作为CO的结果2效果在最稀释的培养物中更加明显。例如,在大气中在37℃下生长2(图1),最稀释的培养物(1,000,000稀释)由于小型接种能力无法达到危重水平,延长了延长的滞后期2开始增长。当同样的培养物在二氧化碳培养箱(图2)或带ACU的BMG LABTECH平板阅读器中培养24小时后,细菌生长分别达到29%和72%时,这个滞后阶段明显较短。德赢vwin官网客服


通过使用二氧化碳孵化器和新的BMG Labtech的ACU进行比较,可以看出,使用BMG Labtech板读取器的串行稀释液的生长速率之间的差异较小。德赢vwin官网客服这很可能是由于CO的恒定温度和水平2在整个实验期间保持。而且,使用CO时2样品必须转移到酶标读卡器上,以测量产生两种一氧化碳的吸光度2最终导致增长率降低的水平和温度波动n.Meningitidis.

表1中所示的结果说明,与二氧化碳培养箱相比,BMG Labtech板读数中的增长速率增加了所有稀释液的统计学意义。德赢vwin官网客服


表1中的结果还揭示了大气CO的BMG Labtech板读取器之间的细菌生长差异德赢vwin官网客服2除1次稀释外(1 / 10:p=0.052)。然而,结果也表明,a CO之间的细菌生长没有显著差异2培养箱和大气合作2哪个是最可能归因于温度和一氧化碳的2提前描述的水平波动。

表1:比较连续稀释培养的生长Neisseria Meningitidis.C751在24小时内,在37°C的二氧化碳培养箱中生长,在递送5%的二氧化碳培养箱中,在BMG Labtech板读者中,ACU提供5%CO德赢vwin官网客服2没有补充合作2(大气孵化器)。使用Minitab 13进行t检验,结果在95%置信区间内为显著(+)或不显著(-)。

比较 CO.2孵化器VS BMG Lab德赢vwin官网客服tech 德赢vwin官网客服BMG Labtech VS大气孵化器 CO.2孵化器VS大气培养箱
稀释
整齐 0.035 (+) 0.040 (+) 0.908 (-)
1在10 0.036(+) 0.052(+) 0.927(+)
1在100 0.010(+) 0.017(+) 0.960( - )
1 in 1,000 0.014(+) 0.034 (+) 0.789(+)
在10000年1 0.014(+) 0.025(+) 0.860(+)
1 in 100,000 0.005(+) 0.002(+) 0.675( - )
1占1,000,000. 0.003(+) 0.000(+) 0.738( - )

结论

综上所述,利用CO2依赖于伤害的Neisseria Meningitidis.已经证明,与ACU的BMG Labtech板读者能够实现和维持一级的德赢vwin官网客服CO2这种挑剔的生物需要生长。这项研究还强调了这种自动化系统相对于二氧化碳培养箱的优势。例如,情况比较稳定,劳动密集程度较低这一事实意味着可以产生更多的数据。该系统不仅适用于一氧化碳实验2依赖生物,例如n.Meningitidis.但也可能被证明在细胞培养研究中非常有用。

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