甲基转移酶，乙酰转移酶，激酶和GTPases都可以用Transcreener测定

介绍

Transcreener^®来自Bellbrook Labs提供通用，用于核苷酸检测的通用的通用HTS测定，如ADP，UDP，GDP和AMP。这些测定有三种检测模式 - 荧光极化（FP）。荧光强度（FI）和时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）。

pherstar系列的微孔板阅读器是所有三种检测格式的完美。对于FP和tri - fret，它使用了一种独特的同时双发射检测系统，在微孔板的一个读数中测量两个发射波长。同时进行双发射检测不仅可以将平板读取时间减少一半，还可以校正由于井眼体积、浓度或激发能量波动而产生的任何信号变化。

在这个应用笔记中，我们展示了pherstar的性能FS.用于检测跨滤器中不同的核苷酸^®外交政策分析。该仪器在10%转换时可实现Z’>0.8和δ mP大于100^®用10μm相应的标准曲线测试的测定。

测定原理

材料与方法

• Transcreener XMP检测试剂
• 黑色的384孔板来自康宁
• PHERAstar^®FS.microplate阅读器(BMG L德赢vwin官网客服ABTECH)

代表所有XDP Transcreener分析ADP²将更详细地解释测定。随着ADP的比率：ATP增加，所附示踪剂与游离示踪剂的比例降低，导致MP值的总体减少。如下所述制备15分标曲线：

1.每一种ATP/ADP组合在384孔黑色板上取10 μL。
2.在这些行中加入10 μL的ADP检测混合液。
3.在P行中加入10 μL ATP/0 μM ADP组合。
4.在P1 ~ P12孔中加入10 μL游离示踪剂。
5.在P13-P24孔中取10 μL缓冲空白。

在FP测量时，应安装跨滤网专用FP模块。激发波长为590 nm，发射波长均为675 nm。当使用只含有游离示踪剂的井将目标mP值设置为20 mP时，应进行焦点和增益调整。

结果与讨论