小型化筛查分析:案例研究

演讲人:Céline Legros(筛选分析发展项目经理,Servier, Paris), Catherine Wark (BMG LABTECH Ltd.应用经理)德赢vwin官网客服

药物筛选研究经常受到样本量和时间的限制。筛选者一方面需要在节省时间和金钱之间找到合适的平衡,另一方面需要产生可靠的、可重复的和定量的结果。因此,人们一直在寻找既能最小化样本消耗和时间,又能提供高质量的击中目标的方法。


在高通量筛选(HTS)中,生物反应的测量通常是通过酶标仪进行的。因此,选择最适合的读卡器对筛选活动的成功有重大影响。的确,该仪器的灵敏度和检测速度对数据质量和节省费用产生积极影响,因此对成功的筛查运动具有重大意义。


敏感有助于节省金钱和时间

虽然,灵敏度直接影响数据质量,它也间接影响筛选成本。由于平板阅读器的灵敏度,检测结果可以从384孔板迁移到1536孔板,或者昂贵的试剂可以进一步稀释,同时保持相同的平板格式。这显然可以节省成本。


此外,灵敏度正影响探测速度。例如,在一个高灵敏度的微孔板阅读器上,激发闪光的数量可以减少而不会对数据质量产生负面影响。保持良好的Z´值与减少的闪光数为每个样品井可以产生可观的时间节省乘以384或1536,进一步由数量板运行在一天或整个活动。

分析缩小规模

筛选试验的小型化或缩小是药物发现过程中的关键步骤。顾名思义,小型化的目标是减少样品的体积和格式,以节省试剂和时间,同时保持可靠性、稳健性和重现性。


微型化可以应用于不同的检测模式和目的。除了药物筛选,甚至蛋白浓度的测定也可以缩小到用于蛋白质组学的范围,就本BCA蛋白定量测定方法而言,缩小到384孔板和1536孔板。


此外,小型化还必须支持最高效的自动化过程的实现,以交付高质量的产品。德赢Vwin安全吗例如,当PHERAstar平板阅读器与专用液体处理设备相结合时,样品的使用量可以限制在1536孔板的2µL,如图所示,以细胞为基础的TNF-α α α含量的微缩试验。


虽然384孔和1536孔格式是HTS中最常用的格式,但试验甚至可以缩小到3456孔板,如基于细胞的GPCR和激酶化验


Servier:一个案例研究

在此免费科学谈话中,我们提出了一个案例研究,使用Pherastar FSX高通量板读数器显着导致Server的两种筛选测定的小型化。


Servier的筛选部门配备了几个BMG LABTECH阅读器。德赢vwin官网客服一个CLARIOstar,一个NEPHELOstar和三代PHERAstars目前被用于初级和二级药物发现活动,要么作为独立的仪器,加上堆栈器,要么完全集成到中、大型机器人平台中。虽然CLARIOstar和NEPHELOstar reader最常用于检测开发,PHERAstars通常用于药物筛选活动。


小型化HTRF化验

上述BMG LABTECH的读者帮助了C德赢vwin官网客服éline Legros, Servier筛选试验发展部门的项目经理,降低了高温热湿法筛选试验的规模和小型化。虽然仍然提供了高质量的数据,但大大节省了试剂和时间。

给出了三个例子。首先,HTRF的成功缩减®讨论了384- 1536井格式的分析方法。在PHERAstar FSX上,检测的小型化与“实时”检测相结合(每孔只有一次闪光),并进一步稀释试剂。这导致高质量的Z值和显着减少试剂的使用和时间。


对于基于TR-FRET和HTRF的检测,PHERASTAR FSX的TRF激光器提供了显着的速度优势,允许在36秒内测量完整的1536孔板,同时保持Z'> 0.8,如图所示细胞和生物化学HTRF测定。

降尺度荧光猝灭法

第二个例子讨论了PHERAstar FSX荧光猝灭试验从384孔板格式降为1536孔板格式。尽管已经小型化,淬灭试验仍然提供了良好的Z'值。

最后,在克拉罗星上测量了快速捆绑动力学。为了应对这种实验的快速动力学和样品量,设计了一种特定的策略,包括使用内置的试剂注射器。

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